細(xì)胞培養(yǎng)的操作方法
2019-04-17
細(xì)胞培養(yǎng)在科研領(lǐng)域里面算是成本費(fèi)用比較高的一項(xiàng)，很多客戶問(wèn)我們，為什么我們把細(xì)胞產(chǎn)品發(fā)貨到他們手上的時(shí)候，細(xì)胞長(zhǎng)勢(shì)以及傳代能力很好；而客戶自己培養(yǎng)一段時(shí)間后，細(xì)胞長(zhǎng)勢(shì)就不行了甚至死亡？細(xì)胞培養(yǎng)不容馬虎大意，在此愛(ài)測(cè)智能科技小編介紹下正確的細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)菌操作的步驟：
1. 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%酒精擦拭無(wú)菌操作臺(tái)面，并開(kāi)啟無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后，才開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái)，以70%酒精擦拭無(wú)菌操作臺(tái)面。操作間隔應(yīng)讓無(wú)菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后，再進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株的操作。
2. 無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管、吸取器或吸管盒等可以暫時(shí)放置，其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出，以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以70%酒精擦拭后才帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在臺(tái)面的中央無(wú)菌區(qū)域，勿在邊緣的非無(wú)菌區(qū)域操作。
3. 小心取用無(wú)菌的實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或容器瓶口，亦不要在打開(kāi)的容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開(kāi)后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
4. 工作人員應(yīng)注意自身的安全，須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對(duì)于來(lái)自人類或是病毒感染的細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作，并選擇適當(dāng)?shù)燃?jí)的無(wú)菌操作臺(tái)。操作過(guò)程中，應(yīng)避免引起aerosol的產(chǎn)生，小心毒性藥品，例如DMSO及TPA 等，并避免尖銳針頭的傷害等。
5. 另外還需定期檢測(cè)CO2鋼瓶的CO2壓力。
6. 水槽可添加消毒劑，定期更換水槽的水。
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